Consilium medicum начало :: поиск :: подписка :: издатели :: карта сайта

ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЯ- ПРИЛОЖЕНИЕ К CONSILIUM MEDICUM  
Том 06/N 3/2004 ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЯ

Способность антацидов адсорбировать и нейтрализовать белки, секретируемые H.pylori


A.Tarnawski, R.Pai, R.Itani, F.A.Wyle Digestion 1999;60:449–455  Перевод: канд. мед. наук М.И. Секачевой Антацид &quota;Тальцид&quota; адсорбирует и нейтрализует все белки, секретируемые H.pylori , включая Vac A-цитотоксин: новый механизм лечения язвенной болезни?


Введение
   
Инфицирование слизистой оболочки желудка H.pylori является причиной хронического гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, кроме того, данная инфекция может играть роль в развитии рака желудка и лимфомы. Хроническая инфекция H.pylori приводит к замедлению заживления язвенного дефекта и рецидивированию язвы. Успешная эрадикация инфекции H.pylori при помощи антибиотиков не только способствует эпителизации язвы, но и значительно снижает риск рецидива. К важным факторам вирулентности H.pylori относится Vac A-цитотоксин, который вызывает вакуолизацию различных видов эукариотических клеток и способствует воспалению. Экспериментальные исследования показали, что Vac A-цитотоксин повреждает слизистую оболочку желудка с образованием язвенных дефектов. Клинические данные свидетельствуют, что язвенная болезнь чаще возникает на фоне инфекции цитотоксинпродуцирующими штаммами H.pylori.
   Мы доказали, что культура H.pylori (Vac A+), постоянно вводимая крысам, замедляет заживление экспериментальных язв желудка, ухудшает качество восстановления архитектоники слизистой оболочки желудка в язвенном рубце, значительно снижает пролиферацию клеток. Наши недавно полученные данные свидетельствуют, что белки (более 10 кДа), секретируемые H.pylori, взаимодействуют с эпидермальным фактором роста (ЭФР), связываясь с его рецептором. Таким образом, данные белки оказывают влияние на пролиферативный ответ клеток слизистой оболочки желудка человека при стимуляции ЭФР. Данные белки, скорее всего, являются продуктом H.pylori, колонизирующего слизистую оболочку желудка. Так как заживление язвенного дефекта требует миграции и пролиферации эпителиальных клеток (оба процесса запускаются ЭФР), взаимодействие H.pylori с рецептором ЭФР может быть причиной замедления заживления язвы и развития измененного язвенного рубца. Учитывая, что фактор роста, стимулирующий миграцию и пролиферацию клеток, является ключевым моментом заживления язвы, устранение ингибиторных влияний секретируемых H.pylori белков должно оказывать дополнительный лечебный эффект.
   Тальцид является антацидом, активным веществом которого служит гидротальцид (Mg6Al2(OH)16CO3 ґ 4H2O). Гидротальцид имеет сетчатую структуру, состоящую из слоев ионов гидроксида алюминия и гидроксида магния в соотношении 1Al(OH)3- к 3Mg(OH)2. Ионы алюминия обеспечивают положительный заряд, а содержащие воду прослойки анионов углерода (СО32-) дают отрицательный заряд.
   Тальцид обладает слизистопротективным действием, активирует ангиогенез в поврежденной слизистой оболочке желудка, ускоряет заживление экспериментальных язв, язвенных дефектов при язвенной болезни, повреждений, вызванных приемом нестероидных противовоспалительных препаратов, улучшает качество рубца слизистой оболочки. Предполагается, что данное противоязвенное действие обусловлено нейтрализацией кислоты желудочного сока, а также запускаемой тальцидом активацией генов слизистой оболочки желудка, кодирующих ЭФР и его рецептор.
   Целью настоящего исследования явилось изучение способности тальцида благодаря своей уникальной сетчатой структуре адсорбировать, удалять или нейтрализовать Vac A-цитотоксин, продуцируемый H.pylori.   

Результаты
   
Рисунок электрофореза белков культур H.pylori был сходен и у (Vac A+) штаммов, и у (Vac A-), за исключением наличия 90 кДа полосы в культуре (Vac A+). Постепенное разведение культуры H.pylori (Vac A+) сопровождалось соответствующим снижением уровня Vac A-цитотоксина. Экспрессия Vac A-цитотоксина H.pylori линейно коррелировала с общим содержанием белка в культуре бактерий (коэффициент корреляции 0,99; р<0,001).
   Антацид тальцид, с которым была инкубирована культура бактерий в течение 3 и 24 ч, эффективно адсорбировал и почти полностью удалял полосу 90 кДа Vac A-цитотоксина H.pylori. В этом отношении омепразол (10 мг/мл) был абсолютно неэффективен. Инкубация культуры H.pylori с тальцидом в течение 1 ч позволяла удалить 84,3±2% Vac A-цитотоксина (р<0,01). Инкубация культуры H.pylori с тальцидом в течение 3 и 24 ч обеспечила полное удаление всех других белков, включая 66 кДа уреазу и 58 кДа белок теплового шока, секретируемых H.pylori (Vac A+) и (Vac A-) (99% удаления; для всех показателей р<0,001).
   Стимуляция Kato III клеток с добавлением 10 нг/мл ЭФР была достоверно выше, чем в клетках, инкубированных только в обычной среде. Культура H.pylori (Vac A+) значительно подавляла стимулированную ЭФР Kato III клеточную пролиферацию. Инкубация Kato III клеток с культурой H.pylori (Vac A+), предварительно обработанной в течение 3 ч тальцидом, значительно уменьшала ингибиторный эффект Vac A-цитотоксина на ЭФР-стимулированную клеточную пролиферацию (все показатели р<0,001).   

Обсуждение
   
Инфекция H.pylori в слизистой оболочке желудка сопровождается развитием хронического активного гастрита, а у некоторых больных – язв желудочно-кишечного тракта. Исследования in vitro показали, что H.pylori способен повреждать клетки желудочного эпителия путем выработки цитотоксинов и ферментов. Прикрепление H.pylori к поверхности эпителиальных клеток является важным условием для местного высвобождения токсинов. Существуют различные штаммы H.pylori, при этом язвенная болезнь чаще развивается на фоне инфекции, продуцирующей Vac A-цитотоксин.
   Первым найденным токсином H.pylori был вакуолизирующий цитотоксин, вызывающий образование вакуолей в эукариотических клетках. Этот белок является крупным олигомером размером 90 кДа, который распадается на два меньших белка размерами 34 и 58 кДа. Данный токсин при интрагастральном введении мышам вызывает повреждение эпителия и изъязвление слизистой оболочки. Наши исследования in vivo продемонстрировали, что культура H.pylori, содержащая Vac A-цитотоксин, замедляет заживление экспериментальных желудочных язв и ухудшает качество образовавшегося после язвы рубца. Таким образом, устранение Vac A-цитотоксина тальцидом может послужить дополнительным фактором для заживления язвенного дефекта и, возможно, способствовать профилактике рецидивирования язвенной болезни.
   H.pylori также производит уреазу, состоящую из двух субъединиц: уреазу А и уреазу В. Этот фермент позволяет H.pylori расщеплять мочевину до аммиака, что защищает бактерию от разрушающего воздействия кислоты желудочного сока. Аммиак, образующийся при действии уреазы H.pylori, оказывает непосредственный повреждающий эффект на клетки эпителия желудка и влияет на прохождение клетками клеточного цикла. Уреаза крайне важна для адгезии H.pylori и, следовательно, для высвобождения бактерией цитотоксинов. Таким образом, устранение уреазы тальцидом снижает образование аммиака, уменьшая повреждение слизистой оболочки, а также предотвращает адгезию H.pylori и высвобождение токсинов.
   Кроме того, к патогенным факторам H.pylori относятся липаза и протеаза, ферменты, разрушающие слизистую оболочку желудка. Протеаза деполимеризует слизь, а липаза и фосфолипаза А2 вызывают разрушение липидов слизистой оболочки с утратой гидрофобных свойств поверхностью слизистой оболочки и нарушением гелевой структуры слизи. Разрушение гелевой структуры слизи обеспечивает обратную диффузию кислоты, что приводит к повреждению клеток, их гибели и, возможно, способствует воздействию карциногенов на эпителиальные клетки желудка.
   H.pylori также вырабатывает большое количество GroEL- и GroEL-подобных белков теплового шока А и В, которые позволяют бактерии переживать неблагоприятные изменения окружающей среды (например, выраженные изменения кислотности) во время колонизации слизистой оболочки желудка. Устранение данных защитных белков теплового шока тальцидом делает H.pylori менее устойчивым к воздействию кислого содержимого желудка, уменьшая тем самым колонизацию слизистой оболочки данными бактериями. В ходе данного исследования мы установили, что тальцид абсорбирует и полностью удаляет выработанные H.pylori белки теплового шока, т. е. тальцид уничтожает белки, обеспечивающие бактерии выживание в экстремальных условиях желудка.
   Настоящее исследование показало, что антацид тальцид в концентрации, сравнимой с создаваемой в желудке при пероральном приеме препарата, полностью абсорбирует все белки, вырабатываемые H.pylori, включая Vac A-цитотоксин, уреазу и белки теплового шока. Тальцид также высокоэффективно устраняет ингибиторное воздействие Vac A-цитотоксина H.pylori на ЭФР-индуцированную пролиферацию желудочных клеток Kato III. По данным прошлого исследования, культура H.pylori (Vac A+) не влияет на исходную пролиферацию клеток, но значительно подавляет ЭФР-стимулированную клеточную пролиферацию, которая имеет огромное значение для заживления язвы. Таким образом, тальцид устраняет факторы, вызывающие повреждение слизистой оболочки желудка: уреазу (необходимую для образования аммиака) и Vac A-цитотоксин. Эти эффекты тальцида уменьшают повреждающее воздействие H.pylori на слизистую оболочку желудка. Более того, тальцид также удаляет белки теплового шока, которые помогают H.pylori адаптироваться к экстремальным условиям окружающей среды. Так как белки, вырабатываемые H.pylori, подавляют ЭФР-стимулированную клеточную пролиферацию и замедляют заживление язвы, названное действие тальцида, возможно, отражает новый механизм его противоязвенного действия помимо его способности нейтрализовать кислоту и индуцировать экспрессию ЭФР.



В начало
/media/gastro/04_03/3.shtml :: Wednesday, 09-Mar-2005 21:45:15 MSK
© Издательство Media Medica, 2000. Почта :: редакция, webmaster